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1、作业中的问题,实验三、土壤中微生物含量的计算,CFU的计算,真菌实验结果记录,作业中的问题,实验四、革兰氏染色,对CFU的认识,实验五 真菌形态及微生物菌落形态的观察,一、实验目的,掌握真菌水浸片的制作显微观察酵母菌的基本形态及出芽生殖显微观察常见丝状真菌的基本形态比较细菌、真菌和放线菌的菌落形态,二、实验菌种,酵母：酿酒酵母（白酵母）、红酵母丝状真菌：根霉、曲霉、青霉、犁头霉细菌：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、八叠球菌放线菌：S-10，S-14,菌落形态观察,制片观察：,（平板：一套可打开用于制片观察，一套不能打开用于菌落形态观察）,酿酒酵母、根霉、曲霉、青霉、犁头霉,三、实验原理（一）、真菌形态
2、观察 通常把真菌分为酵母菌和丝状真菌(霉菌)。霉菌由粗大、有隔或无隔分支状菌丝构成，菌丝分为基质菌丝和气生菌丝。气生菌丝特化结构上产生多种无性、有性孢子。孢子着生部位、排列方式以及孢子形态是真菌鉴定的重要依据。,曲霉,青霉,分生孢子梗,青霉：分生孢子梗,足细胞,曲霉：分生孢子头,根霉：孢子囊、匍匐枝和假根,犁头霉：接合孢子,A.异宗接合 B.同宗接合,酵母菌是单细胞构造，个体形态多为卵圆形、圆柱形，但有时某些酵母菌可形成假菌丝。酵母菌无性繁殖以出芽方式生殖。,酵母菌：出芽,酿酒酵母,白色念珠菌（假丝酵母）,Schizosaccharomyces pombe(fission yeast)裂殖酵母
3、,Saccharomyces cerevisiae(budding yeast)出芽酵母,有关酵母菌教材外知识,Candidiasis albicans 念珠菌,Symptom 症状实例,有关酵母菌教材外知识,四、实验方法直接挑取生长在平板中的霉菌菌体制水浸片观察。,载玻片上滴加一滴水,用接种针挑取菌丝,加盖玻片,均匀涂布于水滴中，尽量分散,作图,10倍或40倍物镜观察,制作犁头霉水浸标本片时，在+/-处先去掉表面菌丝，再向下挑（稍微带一点培养基也可），用50%酒精滴洗，去掉孢子。制作青霉水浸标本时，取菌落边缘白色区域并带一定的培养基，加盖玻片后压片。根霉水浸标本片时可以不用酒精洗。,1、实验
4、目的要求 观察细菌、放线菌、酵母菌、霉菌等微生物具体菌种菌落的形态特征。总结几类微生物菌落的一般特征并能识别。,（二）各类微生物菌落特征观察,菌落形态：形状，边缘情况大小：表面状况：湿润、粘稠或干燥，隆起或扁平，厚或薄，是否粉末状质地：致密或疏松蔓延程度：与培养基结合程度颜色（正面、反面、边沿、中心）气味,微生物在固体培养基上的群体生长,点状,圆状,丝状,不规则状,根状,纺锤状,全缘,波状,裂片状,缺刻状,丝状,卷曲状,细菌菌落特征：凝胶状、表面较光滑、湿润、与培养基结合不紧密，易挑取，正反颜色一致。,酵母菌菌落特征（与细菌相似)：比细菌大而厚，不透明，表面光滑、湿润、粘稠，易用针挑起。多呈乳
5、白色，少数呈红色。,Yeast,Bacteria,放线菌特征:致密、坚硬、多皱、不易用针挑起，不透明。孢子成熟后，表面粉末状，干燥(常有土腥味)。,霉菌的菌落特征比细菌菌落大，由菌丝组成疏松的绒毛状、絮状或蜘蛛网状，有的无固定大小，延至整个培养基中，产色素，使菌落显色。,2、实验步骤分别观察各类微生物的菌落的大小，表面粗糙及含水分状况，边缘，致密程度、透明程度，及厚度等特征，并填写记录表（格式见实验指导书.74或下一张幻灯片）。,（二）、不同微生物菌落形态观察（可参考P72),五、注意事项,低或高背镜观察即可盖盖玻片时不要产生气泡无菌操作,六、结果与讨论,绘出五种真菌的形态特征图并注明各主要部位名称 列表比较微生物的形态特征（细菌、酵母菌、放线菌及丝状真菌）讨论实验的成败,
