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1、实验三 细胞化学成分的显示,掌握血涂片及骨髓涂片制作方法。掌握碱性蛋白、过氧化物酶及核酸显示的原理。熟悉上述化学成分在细胞中的分布。了解上述化学成分显示的方法。,一、目的要求,二、实验内容和实验方法,细胞内碱性蛋白的显示 DNA和RNA的显示 过氧化氢酶的显示,细胞内碱性蛋白的显示,实验原理 标本经三氯醋酸处理抽提掉核酸后，用不同pH值的快绿染液分别染色，使细胞内的酸性蛋白和碱性蛋白质显示出来。,实验方法 1.临时装片的制备。2.固定：70%乙醇，10min。3.7090，5%三氯醋酸，15分。4.清水冲洗。5.染色：碱性固绿染色5min。6.清水冲洗。7.晾干，镜检。,DNA和RNA的显示,
2、实验原理 利用碱性染料甲基绿和派洛宁处理细胞，可使其中的DNA和RNA呈现出不同的颜色，这种颜色上的差异是由DNA和RNA聚合程度的不同所引起。,实验方法蟾蜍血涂片DNA和RNA的显示 1.制备蟾蜍血涂片：同上。2.固定：70%乙醇，5min，晾干。3.染色：甲基绿派洛宁，10min。4.清水冲洗。5.分化：纯丙酮。6.镜检。,1.临时装片的制备。2.固定：70%乙醇，10min。3.7090，5%三氯醋酸，15分。4.清水冲洗。5.染色：碱性固绿染色5min。6.清水冲洗。7.风干，镜检。,1.制备蟾蜍血涂片：同上。2.固定：70%乙醇，5min，晾干。3.染色：甲基绿派洛宁，10min。4.清水冲洗。5.分化：纯丙酮。6.镜检。,碱性蛋白 DNA和RNA,过氧化氢酶的显示,实验原理 过氧化氢酶系能把许多胺类物质氧化为有色化合物，若用联苯胺混合液处理标本，细胞内的过氧化氢酶能把联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝，进而变为棕色的联苯胺腙。,实验方法家兔骨髓细胞中过氧化氢酶的显示取材。2.固定：0.5%硫酸铜，30s1分钟。3.氧化：联苯胺，36分钟。4.清水冲洗。5.染色：1%番红，12min。6.清水冲洗。7.晾干镜检。,
