铅盐沉淀法课件.ppt

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1、第二章 天然药物化学成分提取分离和鉴定的方法与技术,提取,分离纯化,鉴定,药效毒理研究、结构修饰、新药研发,混合物,单体,第一节 提取方法与技术,提取方法与技术,溶剂提取法 浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法、连续回流提取法、超声提取法水蒸气蒸馏法超临界流体萃取技术,溶剂提取法,基本原理依据“相似相溶”原理，选择对有效成分溶解度大而对其他成分溶解度小的溶剂，将有效成分从药材组织中溶解出来的方法。,溶剂提取法,操作关键溶剂的选择根据欲提取成分的亲水性及亲脂性选择与之相适应的溶剂进行提取。常用溶剂？,Pet C6H6 无水Et2O CH3Cl EtOAc Me2CO EtOH MeOH H2O,水

2、亲水性有机溶剂亲脂性有机溶剂,溶剂提取法,操作技术方法,浸渍法渗漉法煎煮法回流提取法连续回流提取法超声提取法,常用溶剂仪器装置操作过程适用范围优缺点,溶剂提取法浸渍法,常用溶剂：水、乙醇仪器装置：有盖的容器操作过程：将药材粗粉置容器中 加入适量的溶剂 常温或加热（4080）浸泡（注：浸泡时应将容器盖严，并经常搅拌或振摇），一般浸泡35日或按规定时间 倾取上清夜过滤 提取液。药材可重复浸泡23次提取范围：适宜含淀粉、树胶等成分较多的药材以及含挥发性成分、遇热不稳定宜分解或被破坏成分的提取。提取优缺点：操作简便，但提取时间长、溶剂用量大，提取效率不高。水为溶剂易发霉、变质，必要时需加适量的防腐剂。

3、,溶剂提取法渗漉法,常用溶剂：水、乙醇仪器装置：渗漉装置操作过程：将药材粉末装于渗漉筒内 上端不断添加新溶剂，使其渗过药粉（溶出可溶性成分）提取液提取范围：适宜对热不稳定且易分解的成分的提取。提取优缺点：有较大的浓度差，提取效率较高。但溶剂用量大，操作较烦。,溶剂提取法渗漉法,粉碎浸润装筒排气浸渍渗漉收集渗漉液,溶剂提取法煎煮法,常用溶剂：水仪器装置：砂锅、铝锅等（勿用铁器）操作过程：将药材饮片或粗粉加适量水 直火加热煮沸1h左右 过滤 提取液提取范围：对含挥发性及遇热不稳定的成分的药材不易用本法。提取优缺点：本法简单易行，提取效率比冷浸法高。但水溶性杂质多，水煎液易发霉。,溶剂提取法回流提取

4、法,常用溶剂：有机溶剂仪器装置：回流加热装置操作过程：将药材粗粉装于圆底烧瓶中 加入适量溶剂 水浴中加热回流提取1h 过滤（残渣重复提取两次，合并提取液）提取液提取范围：不适用于对热不稳定及易分解的成分提取优缺点：提取效率比冷浸法高。但装置较复杂,溶剂提取法回流提取法,回流提取装置,溶剂提取法连续回流提取法,常用溶剂：有机溶剂仪器装置：连续回流提取装置（索式提取器）操作过程：将药材装于滤纸袋，放入提取器内连接装置水浴加热回流提取适当时间 提取液。提取范围：不适用于对热不稳定成分的提取。提取优缺点：溶剂用量少，提取效率高。但装置设备要求高。,溶剂提取法连续回流提取法,溶剂提取法超声提取法,定义：

5、是一种利用超声波提取有效成分的方法。基本原理：利用超声波的空化作用，破坏植物药材的细胞，使溶剂易于渗入细胞内，同时超声波的强烈振动能传递大量能给浸提的药材和溶剂，使它运动们做高速，大大提高了提取效率。特点：提取时间短、提取效率高、无需加热。适用范围：遇热不稳定成分的提取、各种溶剂的提取。,水蒸气蒸馏法,原理是将水蒸气通入含有挥发性成分的药材中，使药材中挥发性成分随水蒸气蒸馏出来的提取方法。适用范围本法适用于能随水蒸气蒸馏而不被破坏并难溶于水的成分的提取，常用于挥发油的提取，此外挥发性生物碱如麻黄碱和槟榔碱亦可用此法提取。,水蒸气蒸馏法,仪器装置：包括水蒸气发生器、蒸馏瓶、冷凝管、接收器等几部分

6、。,三通口（下有螺旋夹）,水蒸气蒸馏法,注意事项：1、发生器内的水量不得超过其容积的2/3。2、安全玻璃管应插到发生器的底部以调节内压。3、蒸馏器内药材要先加水润湿。4、通蒸气的导管应插入蒸馏器内的药材底部。5、蒸馏结束后，首先应打开水蒸气发生器与蒸馏器之间三通下口的螺旋夹，放入空气后，再停止加热。,超临界流体萃取法（SFE）,定义：SFE是一种利用某物质在临界区域形成的流体，对天然药物中有效成分进行萃取分离的新型技术，集提取和分离于一体。常用超临界流体：CO2、氧化亚氮、乙烷、乙烯、甲苯等。基本原理：根据超临界流体对溶质有很强的溶解能力，且在温度和压力变化时，流体和密度、粘度和扩散系数随之变

7、化，溶质的亲和力也随之变化，从而使不同性质的溶质被分段萃取出来，达到萃取、分离的目的。,超临界流体萃取法（SFE）,分类（按溶剂和溶质分离方法的不同）：1、压力变化法在一定的温度下，使超临界流体减压、膨胀，从而降低溶剂的密度，进行分离。2、温度变化法即在恒压下提高温度或降低温度从而将超临界流体与溶质分离。至于采用升温还是降温，则要根据压力条件决定，一般多采用升温操作。3、吸附法在分离器内装填能吸附萃取物的吸附剂。,超临界流体萃取法（SFE）,主要设备：萃取器、分离器CO2-SFE特点：（1）可在低温下提取（2）完全没有残留溶剂（3）提取效率高，节约能耗应用：从石油中脱沥青 从咖啡豆中脱咖啡因

8、从烟草中脱尼古丁 从啤酒花中提取酒花精 香精和香辛料成分的提取,课堂活动,用连线将各种提取方法与其特点和应用连接起来,用有机溶剂自天然药物中提取脂溶性成分,渗漉法,煎煮法,提取能随水蒸气蒸馏且不溶于水的成分,提取有升华性的成分,提取受热易破坏的成分最简便的方法,不加热而浸出效率高,有机溶剂用量少而提出效率高,以水为溶剂加热提取,升华法,水蒸气蒸馏法,连续回流提取法,回流提取法,浸渍法,小檗碱微溶于水，能溶于热水及乙醇。其盐酸盐难溶于水，易溶于热水；而硫酸盐易溶于水。利用此性质，可选择水温浸或渗漉法提取。渗漉法操作如下：取三棵针的根粉碎后用1%硫酸浸泡渗漉，渗漉液用盐酸酸化至pH3，加食盐饱和后

9、，小檗碱盐酸盐结晶即析出。,应用实例,三棵针中的小檗碱可用什么方法提取？,白头翁皂苷易溶于乙醇，可用回流法提取。取白头翁粉末先用乙醚提取，除去脂溶性物质，然后再用乙醇回流，乙醇回流液浓缩至小体积，加适量丙酮，有大量白色粉末沉淀，为白头翁皂苷。,应用实例,白头翁中的白头翁皂苷可用什么方法提取？,丹皮酚有挥发性，可用水蒸气蒸馏法提取。取徐长卿全草粉碎后，水蒸气蒸馏，收集蒸馏液，乙醚萃取，回收乙醚，得粗结晶，再用乙醇重结晶即得丹皮酚。,应用实例,徐长卿中的丹皮酚可用什么方法提取？,其他提取方法与技术,微波辅助提取法定义：利用微波加热的特性对物料中目标成分选择性提取的方法。特点：快速、高效、高度选择性

10、、对环境无危害例子：微波辅助提取鹰爪豆碱及其代谢产物可将产率由传统的52.3%提高到80.3%，且省事、省溶剂。,提高拓展,其他提取方法与技术,旋流提取法定义：采用搅拌机搅拌，一定的搅拌速度、水提温度、提取时间的提取方法。例子：提取金盏花，对提取液中黄酮类化合物、皂甙、有机酸等进行分析测定，结构表明旋流法的提取效率高。,提高拓展,其他提取方法与技术,半仿生提取法定义：即从生物生物学的角度，将整体药物研究法与分子药物研究法相结合，模拟口服给药后经胃肠道装运的环境，为经消化道给药的中药制剂设计的一种新的提取工艺。即将药粉以一定pH的碱水提取，提取用水的最佳pH和其他工艺参数的选择，可用一种或几种有

11、效成分结合主要药理作用指标，采用比例分割法来优选。例子：以芍药甙、甘草次酸为指标，比较芍药止痛颗粒半仿生提取法与传统水煎煮法的提取率，结构半仿生提取法优于传统水煎煮法。,提高拓展,其他提取方法与技术,中药动态逆流提取法 采用动态罐组式逆流提取工艺、单罐循环提取工艺和中药三效节能蒸发器与喷雾干燥装置，并将其组合起来，可实现从药材煎煮、浓缩、醇沉、过滤至浸膏或干粉的过程，适用于多种溶剂连续或间隙提取。,提高拓展,其他提取方法与技术,酶解法：中药制剂中的杂质大多为淀粉、果胶、蛋白质等，可选择相应的酶予以分解出去。加压逆流提取法：是将若干提取装置串连联，溶剂与药材逆流通过，并保持一定接触时间的方法。,

12、提高拓展,第二节 分离精制和鉴定的方法与技术,提取液的浓缩,浓缩可以通过蒸发或蒸馏来完成，具体的方法有常压蒸发、减压蒸馏、薄膜蒸发、反渗透法、超滤法等。浓缩过程中应注意防止热敏性成分被破坏，尽量避免不必要的损失。,旋转蒸发仪,分离、精制方法与技术,系统溶剂分离法两相溶剂萃取法沉淀法结晶法分馏法透析法升华法色谱法,系统溶剂分离法,原理：按极性由小到大的顺序选用不同极性的溶剂组成溶剂系统，一次提取分离提取液中各种不同成分，使各溶解度差异的成分得到分离。目的：确定有效部位,思考题？,某中药中含有脂肪油、生物碱、果胶、皂苷等成分，写出采用适当溶剂，以系统溶剂分离法使之分离的流程，并指出各种成分出现的部

13、位。,两相溶剂萃取法,原理：利用混合物中各种成分在两种互不相溶的溶剂中的分配系数的差异而达到分离的目的,2)分离因子（b值）与分离难易的关系,K=CU/CL,b=KA/KB,K值与萃取次数成反比，即K值越大，萃取次数越少，反之越多,b值越大，越易分离；b 1时，无法分离,1)分配系数（K值）与萃取次数的关系,两相溶剂萃取法,方法：简单萃取法逆流连续萃取法逆流分溶法液滴逆流分配法,两相溶剂萃取法简单萃取法,操作方法注意事项,乳化现象,如何避免？如何破坏？,简单萃取法,避免乳化：在操作过程中，可采用旋转混合、改用氯仿-乙醚混合溶剂萃取或加大有机溶剂量等措施尽量避免乳化现象的发生。,简单萃取法,破坏

14、乳化：较长时间放置。轻度乳化可用一金属丝在乳化层中搅动使之破坏。将乳化层抽滤。将乳化层加热或冷冻。分出乳化层，再用新溶剂萃取。若因两种溶剂能部分互溶而发生乳化，可加入少量电解质（如氯化钠），利用盐析作用加以破坏。在两相比重相差很小时，也可加入食盐增加水的比重。滴加数滴醇类如戊醇改变表面张力，破坏乳状液。,两相溶剂萃取法简单萃取法,pH梯度萃取法？碱性、酸性、两性成分举例：生物碱、黄酮、蒽醌提示：全书重点内容之一,利用混合物中各成分的酸（或碱）性强弱不同，相应改变溶剂PH值使之相继成盐或游离，改变成分在溶剂系统中的分配系数而与其他分成分离的一种方法。,两相溶剂萃取法逆流连续萃取法,利用相对密度差

15、异,两相溶剂萃取法逆流分溶法,利用分配系数不同,两相溶剂萃取法液滴逆流分配法,利用分配系数不同,沉淀法,1、含义 在天然药物的提取液中加入某些试剂，使产生沉淀或降低溶解度，从而获得有效成分或去除杂质的方法。若生成的沉淀是有效成分，要求反应必须可逆；若生成的沉淀是杂质，则为不可逆反应。2、方法 酸碱沉淀法、试剂沉淀法、铅盐沉淀法,沉淀法酸碱沉淀法,黄连粗粉,乙醇温浸、浓缩,乙醇浓缩液,放置、过滤,滤液,加浓HCl，放置,酸性母液,NH4OH碱化，乙醚处理,沉淀,甲基黄连碱,沉淀法酸碱沉淀法,1、原理 利用某些成分能在酸（或碱）中溶解，继而又在碱（或酸）中生成沉淀的性质。这种反应是可逆的，可使有效

16、成分与其他杂质分离。,2、适用范围 此法适用于分离提纯酸性、碱性或两性有 机化合物，如黄酮、蒽醌类酸性成分、一些 生物碱、蛋白质等。,沉淀法酸碱沉淀法,3、应用（1）酸溶碱沉法碱性化合物（生物碱）,例1：曼陀罗叶,石灰水适量，搅拌均匀，苯回流提取,苯提取液,0.5%H2SO4萃取,酸性水液,苯 液,NaOH碱化到pH11，苯提,硫酸阿托品,沉淀法酸碱沉淀法,例2：,苦参粗粉,MeOH室温浸渍3次，每次24h,MeOH提取液,回收MeOH,MeOH浓缩液,加水稀释，加稀HCl调pH34，Et2O洗涤2次,药 渣,酸水液,Et2O液,稍浓缩，加NaOH调pH13左右，加入CH2Cl2提取,总生物碱

17、,沉淀法酸碱沉淀法,3、应用（2）碱溶酸沉法酸性化合物（具有酚羟基的黄酮，具有羧基、酚羟基的蒽醌）具有内酯环结构的化合物（香豆素）,例：槐米粗粉,加约6倍量已煮沸的0.4%硼砂水溶液，搅拌下加石灰乳至pH89，并保持该pH值下微沸2030min，趁热抽滤同法再提2次，合并提取液,提取液,在6070，搅拌下用浓HCl调pH34，静置，沉淀完全抽滤，水洗至洗液呈中性，60干燥,芸香苷粗品,沉淀法酸碱沉淀法,3、应用（3）等电点沉淀法两性化合物（蛋白质）蛋白质等两性物质，通过调节pH至蛋白质的等电点使其沉淀，从而达到提取和纯化的目的。,沉淀法试剂沉淀法,例1：生物碱沉淀试剂（碘-碘化碘、钾化汞钾、碘

18、化铋钾、苦味酸，等）能使生物碱类生成沉淀自酸性溶液中析出。例2：雷氏铵盐沉淀法雷氏铵盐可与水溶性季铵碱生成难溶于水的生物碱雷氏铵盐沉淀析出。例3：胆甾醇沉淀法胆甾醇能与甾体皂苷生成沉淀。,沉淀法试剂沉淀法,1、原理 利用一些成分能与某些试剂产生沉淀的性质，或利用某些成分在不同溶剂中溶解度的差异，通过加入特定试剂或溶剂使生成沉淀，与其他成分分离。,2、常用方法乙醇沉淀法,沉淀法试剂沉淀法,（1）水提醇沉法 在药材浓缩的水提液中加入数倍量高浓度乙醇，使之沉淀而除去多糖、淀粉、黏液质、蛋白质等水溶性杂质。（2）醇提水沉法 在药材浓缩的乙醇提取液中加入数倍量水稀释，放置使之沉淀而除去树脂、叶绿素等水不

19、溶性杂质。,沉淀法试剂沉淀法,水提醇沉法操作要点 药液浓缩时，最好采用减压、低温，浓缩前可视情况调节pH，以保留更多的有效成分。以分次方式或梯度递增方式加入乙醇，逐步提高乙醇浓度，当药液中乙醇浓度达到80%以上，可使蛋白质、淀粉、黏液质、油脂、树脂、树胶等杂质沉淀去除。加乙醇后，将容器口盖严。自然降至室温，再移至冷库中静置12-24小时。,沉淀法试剂沉淀法,醇提水沉法操作要点 先用乙醇提取，树脂、油脂、色素等杂质可溶于乙醇而被提取出来。醇提取液回收乙醇。加水搅拌，静置冷藏一段时间。待完全沉淀后滤过除去。,沉淀法铅盐沉淀法,1、原理 利用中性醋酸铅和碱式醋酸铅在水或稀醇溶液中，能与多种天然药物化

20、学成分生成难溶性的铅盐或铅络合物沉淀，使有效成分与杂质分离。此法既可使杂质生成铅盐除去，又可使有效成分生成铅盐沉淀。,沉淀法铅盐沉淀法,2、适用范围 中性醋酸铅具有羧基、邻二酚羟基的酸性物质 如:有机酸、蛋白质、氨基酸、黏液质、鞣质、树脂、酸性皂苷、部分黄酮苷、蒽醌苷、香豆素、某些色素，等 碱式醋酸铅凡具有酚羟基的物质 大部分中性成分，如中性皂苷、糖类、某些异黄酮及其苷、某些碱性较弱的生物碱，等,沉淀法铅盐沉淀法,3、操作过程 沉淀 脱铅 脱硫,、沉淀、脱铅、脱硫,混合成分的水或乙醇溶液,滴加饱和中性醋酸铅至不再生成沉淀，抽滤,沉淀(脱铅处理)滤液,滴加饱和碱式醋酸铅至不再生成沉淀，抽滤,沉淀

21、(脱铅处理)滤液(脱铅处理),沉淀或沉淀或滤液,悬浮于水或乙醇中通入硫化氢，抽滤,黑色沉淀（PbS）滤液,水洗,黑色沉淀洗水,合并,脱铅滤液,通CO2气体,气泡（CO2、H2S）净化液,沉淀法铅盐沉淀法,、沉淀 通常将天然药物的水或醇提取液先加入中性醋酸铅浓溶液，静置后滤出沉淀，并将沉淀洗液并入滤液，于滤液中加碱式醋酸铅饱和溶液至不发生沉淀为止，这样就可得到中性醋酸铅沉淀物、碱式醋酸铅沉淀物及母液三部分。,沉淀法铅盐沉淀法,、脱铅 方法：硫化氢法 中性硫酸盐法 阳离子交换树脂法 硫化氢脱铅比较彻底，将铅盐沉淀悬浮于新溶剂中，通以硫化氢气体，使分解并转为不溶性硫化铅而沉淀。含铅盐母液亦须先如法脱

22、铅处理，再浓缩精制。,沉淀法铅盐沉淀法,、脱硫 原因：溶液中可能存有多余的硫化氢，可能会参与化学反应 方法：通入二氧化碳气体,黄芩粗粉,加10倍量沸水，煎煮2次，每次1h,沉淀 上清液（水溶性杂质）,加适量水悬浮，加40%NaOH调pH至7再加等量95%乙醇，滤过,药渣 滤液,加HCl调pH12，充分搅拌80保温30min，放冷过夜，滤过,沉淀（粗品）滤液,水洗，50%乙醇洗，再用95%乙醇洗，或重结晶,黄芩苷,课堂练习,人参废渣（550g）,30%EtOH渗漉,EtOH渗漉液 残渣（含人参皂苷）,沸水煮提2次，每次6h，滤过,滤液,浓缩至原体积的1/10加EtOH至含醇量达85%静置滤过，离

23、心,人参多糖粗品（约50g）,课堂练习,中药材,90%EtOH提取,提取液,浓缩,浓缩液,CHCl3萃取,氯仿层 水层,加碱式醋酸铅液，滤过,滤液 沉淀,通H2S脱铅，过滤，水洗，悬浮于水中,滤液 沉淀,课堂练习,课堂活动,七叶一枝花Paris polyphylla 有清热解毒、消肿散瘀的作用，其含有的甾体类皂苷的提取分离方法如下：取药材粉末用乙醇回流提取三次，提取液减压浓缩后，残留物用石油醚脱脂，加水溶解，水液用正丁醇萃取，所得萃取液水洗后减压浓缩，残留物溶于少量乙醇，加大量丙酮即析出沉淀物，必要时，可将沉淀物再溶于乙醇，加丙酮沉淀，反复处理几次，滤过，即得淡黄色皂苷粉末。请分析此提取分离方

24、法，回答以下问题：,课堂活动,（1）操作过程中使用了什么分离技术？,（2）萃取的两相溶剂分别是什么？,（3）萃取结束后应保留上层液还是下层液？,（4）萃取过程中若出现了乳化现象，该如何破乳？,（5）选择的沉淀技术属于哪一种？,结晶法,原理：利用混合物中各成分对某种溶剂溶解度的差别，使单一成分以结晶状态析出，从而达到分离目的。关键：结晶溶剂的选择条件？,结晶与重结晶法,关键,选择合适的溶剂是结晶法的关键。,理想溶剂具备的条件,1、不与结晶物质发生化学反应。,2、对结晶物质的溶解度随温度不同有显著差异，热时溶解度大，冷时溶解度小。,3、对可能存在的杂质，溶解度非常大或非常小（即冷热均溶或均不溶），

25、前一种情况可使杂质留在母液中，后一种情况可趁热滤过以除去。,4、沸点适中，不宜过高或过低，过低则易挥发损失，过高则不易去除。,5、能给出较好的结晶。,结晶与重结晶法,关键,选择合适的溶剂是结晶法的关键。,常用溶剂,查阅有关的文献资料参考同类型化合物的性质及其所选结晶溶剂遵循“相似相溶”规律，结合被提纯物的极性小量摸索试验,结晶与重结晶法,关键,选择合适的溶剂是结晶法的关键。,混合溶剂,乙醇-水、醋酸-水、丙酮-水、吡啶-水、乙醚-甲醇、乙醚-丙酮、乙醚-石油醚、苯-石油醚等，以两种能以任意比例互溶的溶剂组成。要求低沸点溶剂对被提纯物的溶解度大，而高沸点溶剂对被提纯物的溶解度小。,结晶与重结晶法

26、,1、结晶溶液的制备2、趁热滤过，除去不溶性杂质3、将滤液放冷，使析出结晶4、抽气滤过，将结晶从母液中分出5、重结晶6、晶体的干燥,操作步骤,课堂活动,槐米中主含化学成分为芸香苷，其溶解度在冷水中为1:10000，沸水中为1:200；冷醇中为1:650，热醇中为1:60，不溶于乙醚、苯、氯仿、石油醚等溶液中，经提取后所得的粗制芸香苷进一步精制的方法如下：取粗制品2克，悬浮于蒸馏水中，煮沸至芸香苷全部溶解，趁热抽滤，放冷后即可析出精制芸香苷结晶。请进行简单的操作练习，并回答以下问题：,课堂活动,（1）此方法属于何种分离技术？,（2）选择的溶剂是什么？,（3）选择此方法利用了芸香苷什么性质？,（4

27、）若自然放冷无结晶析出或析出量少，可用什么方法促使生成良好结晶？,透析法,透析法是利用小分子物质在溶液中可通过透析膜，而大分子物质不能通过透析膜的性质达到分离的方法。,透析法,透析法是利用提取液中小分子物质可通过透析膜，而大分子物质不能通过透析膜的性质使分子量差异较大的物质达到分离的方法。,透析法,透析法,所选透析膜合适与否是透析法成败的关键透析膜的膜孔有不同规格，要根据具体情况加以选择。常用的透析膜有动物性膜、火棉胶膜、羊皮纸膜（硫酸纸膜）、玻璃纸膜，蛋白胶（明胶）膜等。,操作提示,透析法,本法常用于分离纯化天然药物化学成分中的大分子物质如：皂苷、蛋白质、多肽、多糖等。透析结束后，无机盐、单

28、糖、双糖等小分子杂质可被除去。,操作提示,分馏法,此法是利用混合物中各成分沸点的不同进行分离的方法。适用于能够完全互溶的液体混合物的分离。在中药化学成分的研究工作中，常用分馏法分离挥发油及一些液体生物碱。,分馏法,一般液体混合物沸点相差在100以上，可将溶液重复蒸馏多次，即可达到分离的目的，如沸点相差在25以下，则需采用分馏法。沸点相差越小，需要的分馏装置越精细。,分馏法,一般情况下，如果液体混合物成分间沸点相差较大，可将溶液通过重复多次的蒸馏即可达到分离的目的；如果沸点相差较小，则需采用分馏柱；当沸点相差越小，需要的分馏装置越精细。可用此法分离天然药物中得到的液体混合成分，如挥发油、液体生物

29、碱等。,操作提示,升华法,原理：利用某些固体物质具有在低于其熔点的温度下受热后，不经熔融就直接转化为蒸气，遇冷后又凝固为原来的固体的性质，使之从天然药物中提出的方法。适用范围：本法适用于具有升华性的某些生物碱类、香豆素类、有机酸类的提取，如咖啡碱、苦马豆素、山道年、樟脑、丹皮酚、七叶内酯、水杨酸、苯甲酸等。,升华法,补充：盐析法,是向混合物水溶液中加入易溶于水的无机盐至一定浓度或成饱和状态，使某些中药成分在水中溶解度降低而析出，达到与其他杂质分离的目的。常用于盐析的无机盐有氯化钠、硫酸钠、硫酸镁、硫酸铵等。,课堂活动,请用连线将下列各种混合成分与其相适应的分离方法连接起来。,毒芹总碱中的毒芹碱

30、（沸点166167）和羟基毒芹碱（沸点226）,两相溶剂萃取法,沉淀法,向黄柏粗粉渗漉液中加入一定量的氯化钠得盐酸小檗碱粗品,分离蛋白质中含有的无机盐和其他小分子 杂质,分离除去生物碱盐水提取液中所含的鞣质杂质,分离水提液中皂苷与其他杂质，加入戊醇,精制盐酸小檗碱粗制品（已知盐酸小檗碱热水易溶，冷水难溶）,分离提取液中未知的各种混合成分,盐析法,分馏法,透析法,结晶法,系统溶剂分离法,栝楼提取液可取新鲜栝楼根刨去表皮，压汁，汁液放置过夜，离心后倾出上清液获得。分离提取液中的天花粉蛋白可选择试剂沉淀法。取提取液加等量乙醇至有沉淀析出，离心除去，母液再加0.5倍量乙醇，离心收集此部分沉淀；往母液中

31、再加1倍量的乙醇，析出较纯蛋白质沉淀，沉淀用水溶解后，冷冻干燥，即得天花粉蛋白纯品。,应用实例,栝楼中的天花粉蛋白可用什么方法分离？,尖杉酯碱和高三尖杉酯碱的溶解度相差很小，化学结构只在侧链上相差一个CH2基团，可利用两者在氯仿和pH 5.0的磷酸氢二钠柠檬酸缓冲液中的分配系数不同，对提取液进行40管逆流分配法分离，最后经薄层色谱检查，表明510号管中得到三尖杉酯碱，1114号管中得到三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱的混合物，1520号管中得到高三尖杉酯碱，获得部分分离。,应用实例,如何分离三尖杉提取物中的三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱？,将甘草用冷水浸泡提取2次，合并两次滤液，蒸发浓缩，放冷，加入乙醇并在低温下放置2天后滤过，所得滤液再次蒸发浓缩至形成黑褐色粘稠状抽提液，内含甘草甜素约为15，继续将此抽提液浓缩，干燥后生成粗结晶，最后用稀乙醇对此粗结晶进行重结晶，即可得到精制的甘草甜素。,应用实例,用结晶法分离纯化甘草提取液中的甘草甜素,