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1、分枝杆菌属(Mycobacterium)病原教研室,第11章,教学目的,掌握 结核分枝杆菌的形态染色 培养 抵抗力 结核分枝杆菌的致病性；结核菌素试验熟悉 结核分枝杆菌的微生物学检查和防治原则了解 麻风分枝杆菌的致病性,分枝杆菌属（Mycobacterium）一类细长或稍弯的杆菌 因有分枝生长的趋势而得名 对人类致病结核分枝杆菌 非结核分枝杆菌 麻风分枝杆菌,(Mycobacterium tuberculosis）,第一节 结核分枝杆菌,案例,患者，女，19岁。就诊时主诉：近一个多月来咳嗽，痰中时有血丝，无胸痛，但有明显乏力，消瘦，食欲不振，盗汗，自觉午后低热，心悸。查体：体温38，慢性面容。
2、实验室检查：白细胞8109/L,血沉为70mm/h。X线透视右肺尖有多发小斑片状阴影，边缘模糊。取清晨咳痰进行抗酸染色，镜下见到红色细长略弯曲的杆菌。,思考题：1.引起本病最可能的病菌是什么？还需做哪些微生物学检查以确定诊断？2.该病是如何传播的？所致疾病怎样进行特异性预防？,结核病是一种古老的疾病从新石器时代人类的遗骨和古代木乃伊的骨关节的病理组织中，已发现人类在史前时代已患过结核病。,德国科学家Robert Koch在1882年发现了一种特殊的微生物结核杆菌结核病的致病细菌,世界结核病防治现状,自发现MTB以来，全球约有两亿人死于TB，且疫情发展日趋严重。WHO已将TB作为重点控制的传染病
3、之一，并于1995年起将每年的3月24日定为“世界防治结核病日”，以提醒公众加深对TB的认识,2013年3月24日是第18个“世界防治结核病日”，主题是：你我共同参与，消除结核危害,由于HIV/AIDS流行、人口流动、耐药结核菌的增加，结核菌发病率开始上升。现全球有20亿结核菌感染者，每年新增病例850万，死亡达300人。1993年WHO宣布结核病紧急状态，这在WHO历史上尚属首次,一般情况,我国现状 结核病负担最重的国家之一，仅次于印度，居第二位。5.5亿人感染结核菌，500万结核病患者，其中开放性肺结核病人150万 结核病是传染性疾病中第一号杀手,一般情况,结核杆菌-结核病对人类致病 人型
4、结核杆菌和牛型结核杆菌,一、生物学性状,1.形态与染色 细长略弯曲，端极钝园 呈单个或分枝状排列 有荚膜、无鞭毛无芽胞 在陈旧的病灶和培养物中 形态常不典型,抗酸染色（Ziehl-Neelsen）显示痰标本中 染为红色的特异性抗酸细菌（结核杆菌）,2.培养特性与生化反应,专性需氧营养要求高馋生长缓慢懒罗氏固体培养基丑,糖类发酵试验（）触酶试验（+）热触酶试验（）,与非结核分枝杆菌鉴别试验,结核杆菌培养的菌落,3.抵抗力,理化因子抵抗力较强,耐干燥耐酸碱耐一般消毒剂,怕湿热怕紫外线怕酒精、石炭酸、来苏儿怕抗痨药,4.变异性,耐药性变异-常伴随活力和毒力减弱菌落变异：粗糙型 光滑型 毒力变异：BC
5、G,卡介苗（Bacillus Calmette-Gurin，BCG）1908年Calmette和Gurin将有毒的牛型分枝杆菌培养于含胆汁、甘油、马铃薯的培养基中，经230次传代，历时13年，使其毒力发生变异，成为对人无致病性，而仍保持良好免疫原性的疫苗株,二、致病性与免疫性,脂质：索状因子 磷脂 蜡质D 硫酸脑苷脂蛋白质分枝杆菌生长素,致病物质,索状因子（cord factor）：是分枝菌酸与海藻糖结合的一种糖脂。使结核分枝杆菌在液体培养基相互粘连平行排列呈索状，破坏线粒体膜，影响细胞呼吸，抑制白细胞游走和引起慢性肉芽肿。,致病物质,磷脂：促进单核细胞增生，引起结核结节、干酪样坏死蜡质D：是
6、一种肽糖脂与分枝菌酸的复合物，作为佐剂，激发机体产生迟发性变态反应硫酸脑苷脂：抑制吞噬细胞中吞噬体与溶酶 体的融合，使结核杆菌在吞噬 细胞中长期存在,致病物质,蛋白质 其中重要的是结核菌素 与蜡质D结合-迟发型超敏反应分枝杆菌生长素 脂溶性的铁螯合物,致病物质,肺部感染：原发感染 继发感染肺外感染：脑、肾、骨、关节、生殖器官等 全身播散性结核 消化道结核 皮肤结核,所致疾病,1.原发感染 多见于儿童,（一）肺部感染,原发综合征形成结核结节转归,吞噬细胞内繁殖,（渗出性炎症）,原发性感染,原发性感染见于学龄儿童及未受过感染的成人,结核分枝杆菌,肺泡,吞噬细胞,原发感染（primary infec
7、tion）,全身性粟粒性结核,结核结节 淋巴结病灶逐渐纤维化和钙化,多见于成年人,（一）肺部感染,2.继发感染,（二）肺外感染,部分肺结核患者体内的结核分枝杆菌可经血液、淋巴液扩散侵入肺外组织器官，引起相应的脏器结核,1.免疫性,有菌免疫或传染性免疫抗结核免疫主要是细胞免疫,（三）免疫性与超敏反应,2.超敏反应,机体获得对结核杆菌免疫力的同时，结核分枝杆菌的蛋白质与蜡质D共同刺激T淋巴细胞，形成迟发型超敏反应状态,（三）免疫性与超敏反应,结核杆菌,豚鼠,皮下注射,再 次,1014天局部溃烂不愈，附近淋巴结肿大，细菌扩散至全身,结核杆菌,皮下注射,豚鼠,局部迅速产生浅溃烂易愈合,免 疫 性,是应
8、用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核杆菌是否能引起变态反应的一种试验。,结核菌素试验,.原理,结核菌素试剂有两种：旧结核菌素（old tuberculin，OT）：含结核分枝杆菌的甘油肉汤培养物加热过滤液，主要成分是结核蛋白，也含细菌的其他代谢产物和培养基成分。纯蛋白衍生物（purified protein derivative,PPD）：OT经三氯醋酸沉淀后的纯化物。,结核菌素试验,2.方法：目前多用Mantoux法。取PPD-C和BCG-PPD各5单位分别注入两前臂皮内，4872h后，红肿硬结小于5mm者为阴性反应；超过5mm者为阳性；15mm为强阳性。,3.结果分析：阳性反应：表明机体
9、已感染过结核枝杆菌或 卡介苗接种成功，对结核杆菌有迟发型 超敏反应，说明有特异性免疫力 强阳性反应 表明可能有活动性结核病，尤其是婴儿,结核菌素试验,阴性反应 表明未感染过结核分枝杆菌或未接种过卡介苗 原发感染早期 正患严重结核病或其他严重疾病 细胞免疫功能低下者（如用过免疫抑制者）,4.应用：选择卡介苗接种对象及 测定接种后免疫效果 诊断婴幼儿的结核病 在未接种卡介苗的人群作结核 分枝杆菌感染的流行病学调查 用于测定肿瘤患者的细胞免疫功能。,结核菌素试验,三、微生物学检查法,根据感染部位取材，如痰、尿、胸水等,1直接涂片染色2分离培养3动物试验4结核分枝杆菌核酸及抗体检测,四、防治原则,预防
10、：婴儿出生后即接种卡介苗，较大儿童须做结核菌素试验，阴性者接种。治疗：早期、联合、足量、规范使用抗结核药物。常用药物有异烟肼、利福平、链霉素、对氨水杨酸、乙胺丁醇等。,一旦确诊有传染免费治疗最优先密切接触须找全配合检查早发现预防投药莫怠慢最终切断传染源,发现结核并不难看你如何去把关咳嗽咳痰三周满可疑症状是关键及时就诊防疫站免费痰检拍胸片,防治原则,案例四,患者，女，19岁。就诊时主诉：近一个多月来咳嗽，痰中时有血丝，无胸痛，但有明显乏力，消瘦，食欲不振，盗汗，自觉午后低热，心悸。查体：体温38，慢性面容。实验室检查：白细胞8109/L,血沉为70mm/h。X线透视右肺尖有多发小斑片状阴影，边缘
11、模糊。取清晨咳痰进行抗酸染色，镜下见到红色细长略弯曲的杆菌。,思考题：1.引起本病最可能的病菌是什么？还需做哪些微生物学检查以确定诊断？2.该病是如何传播的？所致疾病怎样进行特异性预防？,提示,痰涂片抗酸染色见红色细长的杆菌，可初步确定为结核分枝杆菌。再将采集后的标本接种于罗氏培养基35-37培养，每周观察生长情况，通常3-4周长出肉眼可见的粗糙型菌落。根据细菌的生长速度、菌落特征、抗酸性染色、生化反应等做出判断。,结核病的传播途径有呼吸道、消化道、皮肤和子宫，但主要是通过呼吸道。,接种卡介苗预防结核病。接种对象为新生儿和结核菌素试验阴性的儿童。接种后6-8周结核菌素试验转为阳性表示接种成功，
12、否则需再次接种。,第三节 麻风分枝杆菌(Mycobacteriu leprae),麻风分枝杆菌-麻风病一种慢性传染病，世界各地均有流行病菌可侵犯皮肤、黏膜和外周神经组织晚期可侵入深部组织和脏器，形成肉芽肿,一、生物学性状,形态与染色 细长略弯曲抗酸染色阳性典型的胞内寄生菌培养特性不能在人工培养基中生长犰狳抵抗力在干燥环境中7天以内仍有繁殖能力,麻风分枝杆菌抗酸染色,二、致病性与免疫性,易感人群 人传播途径 直接接触或由飞沫传播潜伏期 一般是6个月至5年发病慢、病程长麻风瘤型麻风结核样型,病人面部结节融合可呈“狮面”状,根据临床表现、免疫病理变化、细菌检查等可将大部分患者分为瘤型麻风和结核样型麻风；介于两型之间的少数患者又可再分为两类：界限类与未定类，两类可向两型转化。,三、微生物学检查法,1.涂片染色镜检2.麻风菌素试验 应用原理和结核菌素试验相同 麻风菌素常由麻风结节病变组织制备 此试验在诊断上意义不大,四、防治原则,预防：主要依靠早期发现、早期隔离及早期治疗患者，特别对密切接触者要做定期检查。目前尚无特异性的疫苗 治疗：麻风药物主要是砜类，如氨苯砜、苯丙砜、醋氨苯砜等。利福平也有较强的抗麻风分枝杆菌作用,思考题,1.试述结核杆菌的染色、培养、致病物质及感染特点。2.何谓结核菌素试验？解释其原理与应用。,
